1.洗滌液配制 用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液（2號液）按1：10稀釋，如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。

    2.樣本稀釋 用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清樣本按1：100稀釋，如取5ul樣本與495ul樣本稀釋液，混勻。陰性、陽性對照品不用稀釋，直接加樣。

    3.加樣反應 每次試驗設陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔(分別加入陰性、陽性對照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應30分鐘后，甩去孔內液體，每孔注滿工作洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘后再甩凈，拍干。

    4.加酶反應 除空白對照孔外，每孔加酶結合物(1號液) 1滴。37℃避光反應30分鐘后，甩去孔內液體，如上洗滌，拍干。

    5.顯色反應 加底物液(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴，混勻，37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴，終止反應（加終止液后，藍色會變為黃色）并判讀結果。

抗體粗純化試劑盒的結果判斷：

    以空白對照調零，用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。待檢樣本孔A值大于等于陰性對照A值的3.1倍者判為陽性。如陰性對照A值低于0.1時按0.1計算。

抗體粗純化試劑盒的注意事項：

    1.抗體粗純化試劑盒于2-8℃保存，每次使用前應先平衡至室溫。

    2.未使用完的板條應密封保存。

    3.抗體粗純化試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

    4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號抗體粗純化試劑盒的試劑組份不可混用。

    5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清或血漿。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。

    6.37℃孵育時，建議使用水浴箱。如無條件，可在溫箱中放置濕盒進行反應并同時用不干膠膜封蓋板孔。