下面按豬、牛、羊、禽四大類,整理常見動物疫病的常用檢測方法和法定判定標(biāo)準(zhǔn)(以我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部國標(biāo)/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)為主),內(nèi)容偏實(shí)用,適合現(xiàn)場、實(shí)驗(yàn)室參考。
一、豬常見疫病檢測與判定
1.非洲豬瘟(ASF)
檢測方法
熒光定量PCR(qPCR):很常用、很靈敏
普通PCR、等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)
抗原ELISA、膠體金快速檢測
病毒分離鑒定(確診)
判定標(biāo)準(zhǔn)
核酸陽性→判為非洲豬瘟陽性
任何一種核酸檢測陽性即可確診,無需復(fù)檢
臨床+剖檢典型癥狀+核酸陽性→確診疫情
2.豬瘟(CSF)
檢測方法
熒光RT?PCR
抗原ELISA
抗體ELISA(評價(jià)免疫/野毒感染)
病毒分離、免疫熒光
判定標(biāo)準(zhǔn)
病毒核酸/抗原陽性→確診豬瘟
免疫豬群抗體合格率≥70%為合格
非免疫豬抗體陽性→野毒感染
3.口蹄疫(FMD)
檢測方法
熒光RT?PCR
病毒分離鑒定
液相阻斷ELISA(抗體檢測)
非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA(區(qū)分免疫/感染)
判定標(biāo)準(zhǔn)
病原陽性→確診口蹄疫
免疫抗體合格:合格免疫密度≥100%,群體抗體合格率≥70%
4.豬繁殖與呼吸綜合征(藍(lán)耳病PRRS)
檢測方法
熒光RT?PCR
抗體ELISA
病毒分離
判定
病原陽性→感染
抗體S/P值≥0.4為陽性
5.豬偽狂犬病(PRV)
檢測方法
PCR
gE抗體ELISA(區(qū)分野毒/疫苗)
血清中和試驗(yàn)
判定
gE抗體陽性→野毒感染
疫苗免疫僅gB抗體陽性,gE陰性
二、牛常見疫病
1.牛結(jié)核病
檢測方法
牛型結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)(主法)
γ?干擾素釋放試驗(yàn)
PCR、細(xì)菌分離
判定
皮試陽性反應(yīng)明顯→判為結(jié)核陽性牛
陽性牛一律撲殺無害化
2.布魯氏菌病(布病)
檢測方法
虎紅平板凝集試驗(yàn)(初篩)
試管凝集試驗(yàn)(SAT,確診)
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、iELISA
判定標(biāo)準(zhǔn)
牛:SAT滴度**≥1:100**為陽性
初篩陽性必須用確診方法復(fù)核
陽性牛淘汰處理
3.口蹄疫
同豬口蹄疫標(biāo)準(zhǔn),病原陽性即確診。
4.牛病毒性腹瀉/黏膜病(BVDV)
方法:RT?PCR、抗原ELISA、病毒分離
判定:病原陽性即感染。
三、羊常見疫病
1.小反芻獸疫(PPR)
檢測方法
熒光RT?PCR
抗原ELISA
病毒分離
判定
核酸/抗原陽性→確診小反芻獸疫
一類動物疫病,陽性立即撲殺、封鎖
2.羊布魯氏菌病
方法:虎紅平板、試管凝集、ELISA
判定
羊SAT滴度**≥1:50**為陽性
3.羊痘、山羊痘
方法:PCR、電鏡、病毒分離
判定:病原陽性確診。
四、禽常見疫病
1.高致病性禽流感(HPAI)
檢測方法
熒光RT?PCR(通用+亞型鑒定)
病毒分離
血凝抑制試驗(yàn)(HI)
判定
H5/H7亞型陽性→高度可疑
致病性試驗(yàn)/序列分析判定高致病
一經(jīng)確診,全群撲殺
2.新城疫(ND)
檢測方法
熒光RT?PCR
病毒分離
HI抗體檢測
判定
強(qiáng)毒分離/核酸陽性→確診
免疫雞群抗體合格率≥70%合格
3.禽白血病、馬立克病
馬立克:PCR、病理
白血病:p27抗原ELISA、病毒分離
判定:抗原/核酸陽性即感染。
五、通用檢測方法簡要說明
病原學(xué)檢測(確診用)
PCR/RT?PCR、病毒分離、細(xì)菌培養(yǎng)、電鏡
→陽性=當(dāng)前感染,是確診依據(jù)
血清學(xué)檢測(篩查/免疫評價(jià))
ELISA、HI、凝集試驗(yàn)、中和試驗(yàn)
→抗體陽性=曾經(jīng)感染或免疫
快速檢測(現(xiàn)場)
膠體金、LAMP、熒光試紙條
→初篩陽性必須送實(shí)驗(yàn)室復(fù)核